“微生物酶法拆分制备D-泛解酸内酯及用于生产D-泛酸钙与D-泛醇”项目选育了一株能高产立体专一性D-泛解酸内酯水解酶、不利用不降解泛解酸内酯或泛解酸的微生物菌株串珠镰孢霉,建立了国际**的霉菌交联原位固定化方法,酶转化时间短到3~5小时,效率高,反复分批酶转化可达180次以上,所得到的酶水解产物光学纯度达到99%e.e.以上,因此具有较好的技术经济竞争力。该项目采用的D-泛酸钙生产能力微生物酶催化拆分方法,与传统化学拆分方法相比,以生产D-泛醇为例,原材料消耗减少69.2%,废液、废渣排放分别减少65.5%,599-04-2泛解酸内酯产品介绍、43.8%,能耗减少12.7%,生产成本降低了26.5%,599-04-2泛解酸内酯产品介绍,同时,生物法改善了操作环境,599-04-2泛解酸内酯产品介绍,提高了产品品质与产品安全性,提高了D-泛酸生产的整体技术水平,达到了用高新生物技术改造传统化学工业的目的。
化还原酶催化不对称还原制备D-泛解酸内酯氧化还原酶不对称还原酮泛解酸内酯的方法。用L-泛解酸内酯脱氢酶将L-泛解酸内酯氧化成酮泛解酸内酯, 再利用酮泛解酸内酯还原酶将其不对称还原成D-泛解酸内酯。该方法也可将外消旋的泛解酸内酯作为起始原料,经过氧化还原反应后得到D-泛解酸内酯, 过程简单,不需要化学法中的再消旋化反应。
制备方法包括以下步骤:(1)将缬氨酸在过氧化氢酶和α‑酮异戊酸还原酶的作用下,进行酶转化得到α‑酮异戊酸;
(2)将所述α‑酮异戊酸与四氢叶酸在羟甲基转移酶和氯化镁的作用下,反应制备酮泛解酸;
(3)将所述酮泛解酸在α‑酮异戊酸还原酶的作用下,进行酶转化得到泛解酸;
(4)将所述泛解酸制备得到泛解酸内酯。
DL-泛酰内酯的拆分方法,所用的拆分剂为有机碱R-NH↓[2],其中R为C↓[15]H↓[15],包括以下步骤: a)用纯化后的拆分剂与酸反应,生成物加水,加热至80-85℃溶解,在搅拌下滴加DL-泛酰内酯水解液,拆分剂:DL-泛酰内酯的摩尔比=0.5-0.7∶1,反应温度控制在45-55℃,滴加完毕后继续搅拌0.5-1.5小时,然后在室温下自然冷却至20-30℃; b)真空抽滤由a得到的反应液,滤饼进行消旋、回收拆分剂处理,滤液减压蒸馏去水,然后加入有机溶剂进行共沸脱水,残留水分脱去后,蒸去过量有机溶剂进行冷却结晶,过滤得L-泛酰内酯。
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