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utiBlot框架用于在MultiBlot框架中进行单点印迹时,放置正确处理一次印迹,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清洁不足确保框架**的所有系统垫片和阀门均处于院长,无碎屑或盐分。清空真空瓶,然后更换串联的Milx9-FA过滤器。可能由于以下原因堵塞了吸盘座:浓度在补充有缓冲剂的缓冲液中使用0.2-0.5%的干奶脱脂/低脂干0.1%Tweens 20表面活性剂,带有新的污点固定器。牛奶太高不兼容的封闭液使用新的吸盘固定器更换为强力封闭液。吸墨纸架的重复使用吸笔座只供一次性使用。请勿重复使用。低信号或低信号初级和/或次级将抗体浓度增加5到8倍。比标准抗体浓度过低免疫检测上下颠倒标记印迹的蛋白质一侧,并确保该污点检测试剂不敏感更换灵敏度更高的检测试剂,例如足够的Luminata用Forte杨浦区Merck细胞分析仪Merck仪器报价上海益启,采购电阻仪的放心之选。

15分钟。图4.扩展孵化(过夜):SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免
用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件,将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头,直至其滑动。注意:要断开管路连接,请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推,然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器(目录号SLFA05010)可保护真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以产生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴,则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足,则流经系统的流量可能会不一致,从而导致更长的时间。处理时间和/或抗上海益启生物的电阻仪询价公司电话。

润湿印迹。,对于大多数应用和大多数抗体而言,0.5%的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意:请勿使用浓度高于0. 5%的干奶,因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液,请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤,封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1%Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力,并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短,因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL,Mini blot固定器为5 mL,10 mL用于Midi印迹固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot为15毫升),以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。上海益启生物细胞计数器的销售电话。浦东新区Merck手持细胞计数器Merck仪器咨询报价
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